Introduktion till Stamcellslaboratoriet
Introduktion
Metoder
Personal
Allmänt
Stamcellslaboratoriet tillhandahåller framför allt service till Hematologkliniken och Barncancercentrum på Sahlgrenska Universitetssjukhuset. Stamcellslab har som vävnadsinrättning uppgift att från donatorer och patienter ta till vara, processa, frysa in och förvara hematopoetiska stamceller(HSC) som används vid hematopoetiska stamcellstransplantationer (HSCT).
Laboratoriet är godkänt som vävnadsinrättning av Socialstyrelsen enligt SOSFS 2009:30,31,32 och ackrediterat enligt JACIE (Joint accreditation committee ISCT/EBMT). På laboratoriet finns också den Nationella navelsträngsblodbanken, se: http://www.sahlgrenska.se/su/navelstrangsblodbanken
Stamcellskällor
Hematopoetiska stamceller (HSC)kan utvinnas från benmärg, perifert blod och navelsträngsblod.
Benmärg aspireras från patienten eller donatorn under narkos.
Perifera stamceller samlas med hjälp av aferesteknik (centrifugeringsteknik) efter det att patientens eller donatorns stamceller mobiliserats med G-CSF (granulocyt kolonistimulerande faktor).
Navelsträngsblod samlas i samband med att barnet är fött och avnavlat. Samtycke från föräldrar för donationen måste finnas innan insamling.Vanligaste formen för insamlande av HSC är perifer stamcellsskörd.
Autolog stamcellstransplantation
Den autologa stamcellstransplantationen används i behandlingen av vissa cytostatikakänsliga sjukdomar. Principen är:
• Patientens egna stamceller samlas in och fryses och förvaras på stamcellslab vid låg temperatur (-180 grader C).
• Patienten får en mycket stark cytostatikabehandling som slår ut den egna benmärgen
• De frysta stamcellerna tinas och ges intravenöst (transplanteras) till patienten. De tinade cellerna etablerar sig i benmärgen och utgör ett stamcellsstöd för nybildning av patientens blodceller
Allogen stamcellstransplantation
Allogen stamcellstransplantation innebär att stamceller förs över från en donator till patient. Patienten och donatorn måste ha samma vävnadstyp, HLA (human leukocyte antigen) för att patienten skall kunna acceptera donatorns främmande celler. Donator är ofta ett HLA-likt syskon eller en HLA-lik donator som identifierats via ett donatorregister. Stamceller för transplantation kan också komma från en HLA matchad, fryst navelstängsblodenhet från en navelsträngsblodbank. En allogen stamcellstransplantation är ett led i behandlingen av vissa elakartade sjukdomar som t.ex. leukemier. Proceduren sker i flera steg:
• Patienten får en cytostatikabehandling, ibland kombinerad med strålning. Avsikten med denna behandling är dels att slå ut tumörceller, dels att förhindra att donatorns celler stöts bort. Förbehandlingen kan ske på olika sätt och med olika styrka.
• Stamceller från donatorn samlas in.
• Stamcellerna ges intravenöst och tar sig till benmärgen, etablerar sig och patienten bildar nya blodceller av donatortyp.
Tillvaratagande
Benmärg
Stamcellslaboratoriets personal medverkar vid insamlingen av benmärg. Personalen har ansvar för att den aspirerande benmärgen samlas sterilt i transferpåsar och att rätt mängd antikoagulantia tillsätts.
Perifer stamcellsskörd
Perifer stamcellsskörd görs av specialutbildade aferessköterskor på Hematologavdelningen. Vid avslutad skörd hämtas stamcellskoncentratet på avdelningen.
Navelsträngsblod
Samlas in på förlossningsavdelningarna av barnmorskor på Sahlgrenska/Östra och Karolinska/Huddinge. Blodet transporteras till stamcellslab för processning, frysning och förvaring. Navelsträngsblodenheter distribueras till patienter över hela världen.
Donatorceller
Celler skördade på donatorer och frysta navelsträngblodenheter från andra centra i världen transporteras och tas om hand på stamcellslab.
Processning
All processning och infrysning av stamceller sker i renrum av renhetsklass C.
Benmärg
Autolog benmärg processas efter skörd för att få en mindre volym inför frysning. En buffycoat framställs med hjälp av en cellprocessor (COBE2991®).
Allogen donatormärg reduceras på inkompatibel plasma alternativt inkompatibla röda blodkroppar vid minor och major AB0 inkompatibilitet mellan donator och patient. Detta görs även det med hjälp av COBE2991.
Perifera stamceller
Perifera stamceller reduceras på plasmavolym vid minor AB0 inkompabilitet och vid låg cellkoncentration med hjälp av en cellprocessor kallad Sepax®.
Vid hög cellkoncentration späds cellerna till en lägre koncentration innan infrysning.
Navelsträngsblod
Navelsträngsblod processas till en buffycoat innan infrysning med hjälp av en Sepax® cellprocessor.
Donatorlymfocyter
Vid överskott av stamceller vid skörd av en donator kan donatorlymfocyter frysas in i förutbestämda doser. Dessa ges för att uppnå en GVL (graft-versus-leukemia) effekt efter transplantation då man misstänker återfall i sjukdomen hos patienten.
Infysning
Vid infrysning av stamceller tillsätts DMSO (dimetylsulfoxid) för att motverka att cellerna fryser sönder. DMSO binder vattenmolekylerna i cellen och därmed minskar bildningen av iskristaller vid infrysningen och cellerna sprängs inte sönder vid upptiningen. Cellerna fryses in i -80 grader C och flyttas därefter till lågtemperaturförvaring i -180 grader C.
Förvaring
Alla stamceller förvaras vid låg temperatur (-180 grader C) i gasfasen av flytande kväve i stora tankar. Navelsträngsblodet förvaras i flytande kväve (-196 grader C) i tankar.
Transplantation
Autologa stamceller
Vid autolog transplatation tinas cellerna av stamcellslabs personal på aktuell avdelning där patienten vårdas. Cellerna tinas i en stamcellstinare som håller +37 grader C och cellerna ges intravenöst till patienten direkt efter upptiningen.
Allogena stamceller
Stamcellerna ges färska efter skörd av donator. Vid transplantation av navelsträngsblod och frysta donatorlymfocyter ges dessa efter upptining som vid en autolog transplantation.
Kvalitetskontroller
På stamcellsprodukter från både donatorer och patienter görs följande kvalitetskontroller:
LPK (vita blodkroppar) koncentration
Diff poly/mononukleära celler
Viabilitet färska och frysta celler
CD34+ celler (stamcellsmarkör) - Klinisk Kemi
CD3+ celler (T-celler) - Klinisk Kemi
CFU-GM (odling av stamcellskolonier) - Klinisk Kemi
Sterilkontroller på stamcellsprodukten
Smittester på donator eller patient
Kontrollblodgrupp på donator eller patient
På laboratoriet arbetar BMA, USK och läkare.
Om du har frågor som rör Stamcellslaboratoriet kontakta gärna:
Berit Waldner 031-342 78 62