Mitogen- och antigenstimulerad immunglobulinproduktion (ELISPOT)
Indikation
Utredning av immundefekt, uppföljning av immunmodulerande behandling.
Provtagning, transport och förvaring
För analysen åtgår 10 mL heparinblod. Provet får ej utsättas för kyla. Provet måste förbeställas och skall vara laboratoriet tillhanda senast kl. 13.00 provtagningsdagen.
Laboratoriemedtodik
Mononukleära celler (lymfocyter och monocyter) separeras från blod och stimuleras med mitogenerna EB-virus och PWM (pokeweed-mitogen) eller med antigen, t.ex tetanustoxoid, som stimulerar B-cellerna till immunglobulinproduktion. Efter 6 dagar bestäms antalet immunglobulinproducerande celler med ELISPOT-teknik. Vid inkubering frisätts immunglobulin från antikroppsbildande celler och binds till anti-immunglobulinet på kammarens botten. Bundet immunglobulin visualiseras med enzymkonjugerade antikroppar mot IgA, IgG eller IgM. Härvid framträder en färgad fläck (spot) motsvarande läget för varje enskild immunglobulinproducerande cell.
Svar och bedömning
Antalet spots per miljon celler anges. Sänkt immunglobulinproduktion ses vid immundefekter, förhöjd produktion vid autoimmuna sjukdomar och vissa infektioner. Antigenspecifika spots kan användas för att bedöma immunsvaret efter vaccination.