Antikroppar mot hud (basalmembran och intercellulärsubstans) * samt BP 180 och Dsg 1/3 (ej ackrediterade)
Indikation
Misstanke om pemfigus eller pemfigoid. Desmoglein-1 och desmoglein-3 (dsg-1 och dsg-3) är båda adhesionsmolekyler med en viktig roll i cellens desmosom och hjälper till att hålla keratinocyterna i epidermis. Vid en övervägande mukös form av pemfigus vulgaris ses framför allt ett antikroppssvar mot dsg-3 medan man vid den mukokutana formen samt vid pemfigus foliaceus istället finner cirkulerande antikroppar mot dsg-1. BP-180 är ett transmembranprotein som hjälper till att förankra keratinocyterna i stratum basale och de detekteras med hög specificitet hos patienter med pemfigoid.
Laboratoriemetodik
Indirekt immunfluorescensmetodik. Patientens serum inkuberas på fryssnitt av ap-esofagus. Eventuella antikroppar i patientprovet binder till strukturer i epitel eller basalmembran.
ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay). Patientserum inkuberas i ELISA-brunnar förcoatade med:
1. Humant rekombinant BP 180 NC 16a protein.
2. Rekombinant Desmoglein 1 protein (Dsg 1).
3. Rekombinant Desmoglein 3 protein (Dsg-3).
Eventuellt bundna antikroppar påvisas genom tillsats av horse-radish peroxidase (HRP)- konjugerade antikroppar mot humant IgG och enzymsubstratet Tetramethylbenzidine. Efter färgutveckling stoppas reaktionen med 0,5M H2SO4. Absorbansen mäts vid 450 nm och är proportionell mot mängden antikroppar i provet. Metoden är semikvantitativ och koncentrationen anges som enheter/mL.
Svar och bedömning
Antikroppsmängden anges som ett titervärde motsvarande den spädning av patientserum som ger upphov till en positiv reaktion. Antikroppar mot epitelskiktets intercellulärsubstans förekommer vid pemfigus medan antikroppar mot basalmembran ses vid pemfigoid.
BP 180:
Värden < 20 enh/mL svaras negativa
Värden på 20 enh/mL eller högre svaras positiva
Dsg 1:
Värden < 20 enh/mL svaras negativa.
Värden på 20 enh/mL eller högre svaras positiva.
Dsg 3:
Värden < 20 enh/mL svaras negativa
Värden på 20 enh/mL eller högre svaras positiva.
* = Ackrediterad analys