Antikroppar mot cellkärnor,
ANA-screen *
Se även ANA och antikroppar mot SS-A/SS-B, Sm/RNP, Scl-70, Jo-1, nativt DNA, histon samt ribosomalt p-protein.
Indikation
Utredning av inflammatorisk bindvävssjukdom, speciellt vid misstanke om SLE.
Laboratoriemetodik
Indirekt immunfluorescensmetodik på humana celler från cellinjen HEp-2. Efter inkubering med patientserum påvisas antikroppar som bundit till strukturer i cellkärnan med fluoresceinmärkta antikroppar mot humant immunglobulin.
Förutom indirekt immunfluorescens utföres även screen för specifika antikroppar mot SS-A60, SS-A52, SS-B, Sm, RNP, Scl-70, Jo-1, Centromer B, samt nativt DNA med Multiplex-teknik. Vid positivt resultat utföres verifieringsundersökning med immunodiffusion. Antikroppar mot Centromer B-protein verifieras med indirekt immunofluorescens (se ovan), antikroppar mot SS-A52 verifieras med en automatiserad ELISA-metod. Antikroppar mot nativt DNA analyseras med ELISA och immunocytokemi för verifiering.
Svar och bedömning
Indirekt immunofluorescens på Hep-2-celler ger antikroppsmängden som ett titervärde motsvarande den högsta spädning av patientserum som ger positiv reaktion mot cellkärnor. Förhöjda titrar förekommer vid SLE men kan även ses vid andra inflammatoriska bindvävsjukdomar, till exempel systemisk skleros, MCTD (Mixed Connective Tissue Disease), Sjögrens syndrom och reumatoid artrit.
Reaktionen uppvisar hög diagnostisk sensitivitet men låg diagnostisk specificitet och undersökningen är väl lämpad för screening.
Förekomst av ANA utgör ett av de diagnostiska kriterierna vid SLE.
Flera olika typer av kärnfluorescensmönster förekommer:
1. Homogent vid SLE
2. Kornigt vid SLE, MCTD och andra inflammatoriska bindvävssjukdomar
3. Nukleolärt vid systemisk skleros
4. Centromer framför allt vid CREST (Calcinosis, Raynaud´s phenomenon, Esophageal dysfunction, Sclerodactyly and Telangiectasia)
5. PCNA, prolifererande cellers kärnantigen vid SLE
För vidare specificitetstestning vid anti-nukleära antikroppar gäller, att antikroppar mot nativt DNA och histoner oftast ger ett homogent fluorescensmönster, antikroppar mot SSA, SSB, Sm och RNP ett kornigt mönster, Scl-70 ett homogent/nukleolärt mönster medan antikroppar mot Jo-1 inte ger positivt ANA-resultat.
Resultat av screening för specifika antikroppar med Multiplex-teknik och verifierande analyser anges som "Påvisat" eller "Ej påvisat". Antikroppar mot nativt DNA som verifierats med ELISA anges i internationella enheter (IU) inom mätområdet. Resultat av immuncytokemi anges som ett titervärde motsvarande den högsta spädning av patientserum som ger positiv reaktion.
* = Ackrediterad analys